鸡感染马立克氏病病毒后可抑制,检测鸡马立克病毒最简单的方法是

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  鸡感染马立克氏病病毒后可抑制,检测鸡马立克病毒最简单的方法是

  从病鸡和许多外表正常的鸡身上分离病毒株并不困难。用于病毒分离的优选样品是脾或外周血中的肿瘤细胞、肾细胞和白细胞。因为mdv在这些组织中高度细胞结合,所以必须使用全细胞作为接种物。羽囊是从病鸡中分离完整病毒颗粒的唯一良好来源。可以通过接种易感鸡、细胞培养物和鸡胚来分离怀疑含有mdv的样品。

  小鸡接种:这是分离mdv最敏感的方法。选取易感鸡,在1日龄或1周龄内腹腔接种感染,然后严密隔离观察。接种18 -21天后,对试验鸡以及相应的阳性和阴性对照组进行感染迹象检查。测试应该持续至少10周。

  细胞培养法:这种方法虽然不如鸡接种法灵敏,但简单易行,仍有很大的实用价值。首先,制备鸭胚成纤维细胞或鸡肾细胞的培养物,最合适的接种物是白细胞、肿瘤细胞或血液。在5-14天出现典型的mdv蚀斑,但在对照培养物中未发现这种变化,这是mdv分离的证据。这种特征性斑块由圆形和梭形屈光细胞以及含有cowdrva型核内含物的多核细胞组成。

  鸡胚接种法:通过卵黄囊或绒毛尿囊膜接种病毒的鸡胚,在接种后4-6天或10-11天会在绒毛尿囊膜上产生痘样斑点。

  在实验室诊断中,md的血清学试验通常采用琼脂凝胶免疫扩散试验检测mdv抗原及其沉淀抗体。病鸡组织中的病毒抗原和肿瘤细胞上的肿瘤相关表面抗原(matsa)可用荧光抗体法或酶抗体法检测,也可检测血清抗体。用md阳性血清作琼脂扩散试验检查羽囊抗原非常简单。从待检鸡身上拔几根含羽髓的羽毛,把含羽髓的部分剪下来,放在一个绿色的小瓶子里,用玻璃棒挤压提取,就可以用在实验中了。该方法灵敏度高,人工感染mdv的鸡,接种20天后羽髓抗原阳性率可达90%以上。用已知的mdv抗原作为琼脂扩散试验检测血清抗体,可用于免疫性疾病的诊断和流行病学调查。

  病毒中和试验(vn)或空斑减少试验可用于检测感染鸡血清中的中和抗体。

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