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依据猪恶性水肿病临床症状,结合体表有无外伤可以做出诊断,但应注意与魏氏梭菌、气肿疽的鉴别诊断,必要时采取病料进行细菌学诊断。
1.病料的釆取 生前于局部穿刺采取水肿液;死后除采取局部水肿液和坏死组织外,还要采取肝、脾、肾、肺及心血,尤以肺脏含菌较多。
2.显微镜检查 将水肿液、脏器或心血制成涂片,肝脏表面应做触片,自然干燥、火焰固定后用革兰氏染色法染色镜检。腐败梭菌(恶性水肿杆菌)为细长、两端略圆呈棒状的大杆菌,特别是在肝表而及浆膜触片染色标本中,菌体形成微弯曲的长丝状,这一形态特征在诊断上具有很重要的意义。芽孢呈卵圆形,较菌体大,位于菌体中央或近端。无荚膜,能运动。革兰氏染色阳性。
3.细菌培养 采取局部水肿液或尸体的肝脏组织,放于肝片肉汤中,置37°C恒温箱内培养,24小时后,则肝片肉汤呈现混浊,有沉淀。经3~4天后,取其沉淀物0.1 ~0.5毫升,移于新肝片肉汤中,置80°C温水中30分钟后取出,冷却后置于37°C温箱中培养,待充分发育后利用普通琼脂斜面培养,经证明无需氧菌混杂时,利用血液葡萄糖琼脂平板进行厌氧分离培养,若见有卷曲长丝状、柔嫩花边样菌落,且有溶血环时,则认为是恶性水肿梭菌,即可确诊。
4.动物试验 取局部水肿液或尸体肝脏组织制成5~10倍悬液,或以肝片肉汤纯培养物0.1 ~ 0.2毫升,接种于豚鼠股部肌肉中,经18~48小时豚鼠死亡,注射部位发生严重出血性水肿,肌肉湿润,呈鲜红色,用局部水肿液制作抹片镜检时,见有两端钝圆的大杆菌,肝脏表面触片检查,发现有长丝状大杆菌时,即可确诊。
5.荧光抗体染色法(直接法)取肝脏表面触片数张,先用丙酮固定10分钟,再经磷酸盐缓冲液浸洗2 ~3分钟后,放入事先垫有浸湿滤纸,且在温箱中预热至37°C的大培养皿中,再滴加腐败梭菌的荧光抗体数滴于标本片上,盖上皿盖,作用30分钟,取出,将标本片先后在两个盛有磷酸盐缓冲液的小缸中各浸洗5~7分钟,干后滴缓冲甘油(缓冲液1份,无水甘油9份)1滴,盖上盖玻片,于荧光显微镜下检查,如见有鲜艳的黄绿色无关节长丝状腐败梭菌的形态,即可确诊。
取病料接种于肉肝汤,在37°C厌氧培养24~48小时,纯化后进行牛乳发酵试验来鉴定产气荚膜梭菌,牛乳培养基的“暴烈发酵”是产气荚膜梭菌最突出的生化特性。肉肝汤中5~6小时即呈均匀混浊,并产生大量气体。接种牛乳培养基中培养8~10小时后,牛乳即被凝固,同时产生大量气体,使凝块变成多孔的海绵状,严重时被冲成数段,甚至喷出管外。腐败梭菌在牛乳中产酸、产气,缓慢凝固牛乳。
猪恶性水肿病的防治方法
平时注意防止外伤,发生外伤后及时处理,注意消毒和早期预防,各种外科手术、针灸与注射等应无菌操作,且注意术后护理。在梭菌病常发地区,常年注射梭菌病的多联苗,可有效预防猪恶性水肿病的发生。
猪恶性水肿病经过急,发展快,全身中毒严童,治疗应从早从速,局部疗法与全身疗法同时进行。局部治疗要尽早切开脓肿部位,扩创清除创内异物、坏死组织和水肿液等,再用大量氧化剂(如0.1%髙锰酸钾或3%过氧乙酸液)冲洗,然后撒上青霉素粉末,并施以开放疗法;或在肿胀部周围注射青霉素,甚为有效。全身治疗以早期采用抗菌消炎(青霉素、链霉素、土霉素或磺胺类药物治疗)为好,同时还要注意对症治疗,如强心、补液、解毒。
要隔离病畜,污染的畜舍和场地用10%漂白粉或3%氢氧化钠热水溶液消毒,烧毁或深埋病畜尸体、粪便、垫草等。
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